Azay-Mycobactéries
 PROCEDURE

Contrôle de qualité
 PR-CQ-001

Rév A
 P 1/5

 
Indice de révision
 
Nature de la modification
  A
  Création

 

 

 

 

 

Sommaire 

 

I - Objet

II - Domaine d'application

III - Documents de référence

IV - Contrôles de Qualité

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Pour application le

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I - Objet

La présente procédure a pour objet de déterminer les modalités de contrôle des examens mycobactériologiques afin d'assurer la qualité des résultats rendus.

 

II - Domaine d'application

 Cette procédure s'applique à l'ensemble des biologistes, internes, et techniciens(nes) du laboratoire.

 

III - Documents de référence

Guide de Bonne Exécution des Analyses; Arrêté du 2 novembre 1994.

 

 IV - Contrôles de Qualité

 

 1 - Digestion - Décontamination des prélèvements

2 - Milieux de culture

3 - Colorants

4 - Tests biochimiques

 

 

 1 - Digestion - Décontamination des prélèvements

Faire un contrôle de qualité à chaque préparation de réactifs de digestion - décontamination

- Prendre 3 à 5 crachats et les ensemencer avant et après décontamination, sur milieu gélose au sang, ou sur milieu à l'oeuf.

- Incuber 24 à 48 h sur 37° C.

- Compter le nombre de colonies, en comparant pour chaque crachat, les boîtes ensemencées avant et après décontamination.

 

Interprétation

- Si le nombre de colonies après décontamination est compris entre 3 % et 5 % du nombre total sans décontamination. Décontamination acceptable.

- Si le nombre de colonies est inférieur à 3 % Décontamination trop poussée.

- Si le nombre de colonies est supérieur à 5 % Faible décontamination ou digestion incomplète.

 

2 - Milieux de culture

Pour les milieux de culture (cf. MO-MYC-003), Un contrôle de l'aspect, de la couleur, de la stérilité du milieu, de la croissance sur ce milieu est établi selon un modéle d'enregistrement proposé en page 4 avec la souche de référence M. tuberculosis H37Ra, ATCC 25177 ou 27294.

 

3 - Colorants

Les colorations de Ziehl-Neelsen, de Kinyoun, et de Degommier (cf. MO-MYC-004) sont contrôlées sur des frottis préparés avec la souche M. tuberculosis H37Ra, ATCC. 25177 ou 27294.

 

4 - Tests biochimiques

Les tests biochimiques décrits en MO-MYC-005 sont contrôlés par des souches de référence selon le tableau établi en page 5.

 

 

Contrôle de qualité des milieux de culture

 Laboratoire

Bactériologie-Virologie

Hygiène hospitalière
 Nom du milieu de culture ou du réactif
 Date de fabrication ../../98

 

N° Lot:........

 

 Poudre N° Lot:.......
 Conditionnement:

- Boîte de pétri

- Tube

 Date d'expiration

../../98

 

 

Après conditionnement

 Caractéristiques
 Résultats
 Normal

 Aspect

 

 

 Couleur

 

 

 Stérilité

4 jours à 37°C

4 jours à T° ambiante

 

 

 Stérile

 Activité bactérienne

Souche ATCC M. tuberculosis

 

 

 Pousse de .......

 

 

 Contrôle de qualité des tests biochimiques (page 5)

 Milieux

 Micro-organismes

 Résultats attendus

 Photochromogénicité

 M. kansasii ATCC 12478

Pigmentation des colonies après 2 h d'exposition en lumière vive et remise à l'étuve 24 heures.

 Uréase

 M. kansasii ATCC 12478

 Coloration rouge framboise

 

 M. avium ATCC 25291

 Pas de coloration

 Catalase pH 7 à 68° C

 M. tuberculosis ATCC 27294

 Négative

 

 M. fortuitum ATCC 6841

 Positive

 Niacin Test

 M. tuberculosis ATCC 27294

Coloration jaune (culture de 3 à 4 semaines).

 

 M. fortuitum ATCC 6841

 Pas de coloration

 Nitrate réductase

 M. tuberculosis ATCC 27294

 Coloration rouge framboise

 

 M. bovis ATCC 19210

Pas de coloration après ajout de NR I et NR II . Coloration rouge après adjonction de zinc.

 Phosphatase acide

 M. terrae ATCC 15755

 Coloration rouge framboise

 Hydrolyse du tween 80

 M. kansasii ATCC 12478

 Coloration rose rouge

 

 M. bovis ATCC 19210

 Pas de coloration

 Mannitol

 M. peregrinum ATCC 14467

 Croissance

 Inositol

 

 

 Citrate de sodium

 M. chelonei NCTC 946

 Croissance

Hydrazide de l'acide thiophène-2-carboxylique (TCH)

 M. tuberculosis ATCC 27294

 Croissance

 

 M. bovis ATCC 19210

 Pas de croissance

 D-Cyclosérine (D-CS)

 M. fortuitum ATCC 6841

 Croissance

 Ethambutol (EMB)

Thiosemicarbazone (Tb1)

 

M. smegmatis ATCC 19420

 

Pas de croissance